www.klinickafarmakologie.cz / Klin Farmakol Farm 2022;36(1):4-7 / KLINICKÁ FARMAKOLOGIE A FARMACIE 5 ORIGINÁLNÍ PRÁCE Stanovení plazmatických koncentrací ampicilinu při jednorázovém podání v kardiochirurgické profylaxi V kardiochirurgii je ampicilin používán v kombinaci se sulbaktamem jako profylaktické antibiotikum jak při běžných výkonech, tak při výkonech s použitím mimotělního oběhu. Všechny kardiochirurgické operace jsou vzhledem ke své technické náročnosti velkým zásahemdo lidského organismu. Otevřený hrudník, kontakt krve s umělým povrchem hadicových setů přístroje pro mimotělní oběh, časté použití umělýchmateriálů (chlopně, cévní protézy apod.), vedená hypotermie, hemodiluce, srdeční zástava a časová náročnost operace přispívají ke zvýšenému riziku infekčních komplikací, které mohou být pro nemocného extrémně rizikové. Účinná antibiotická profylaxe je u nich nutností, přičemž volba použitých antibiotik je dána zvyklostmi pracoviště, vázanými většinou na lokální epidemiologickou situaci (5). Některé kardiochirurgické operace, při kterýchnení nutná srdeční zástava a otevření srdečníchdutin, lzeprovést i bez použitímimotělního oběhu. Jedná se zejména o tzv. revaskularizace myokardu, při kterých je koronární anastomóza provedena na bijícímsrdci s pomocí speciálního stabilizátoru. Eliminace přístroje promimotělní oběh může vést ke snížení zánětové odpovědi organismu, obvykle ale bývá technicky náročnější a lze provést pouze u pacientů s vhodným koronarografickým nálezem. Při aortokoronární revaskularizaci myokardu se používá autologní štěp (vlastní žíla nemocného) k přemostění stenotických koronárních tepen. Tento štěp se obvykle odebírá z dolních končetin (bérec, stehno) a poté je našit na srdce a aortu. Vzhledem k další operační ráně a dalšímu kožnímu řezu zde existuje vyšší riziko bakteriální kontaminace, přenesené do oblasti mediastina. Na kůži běžně se vyskytující stafylokoky jsou jedny z nejčastějších patogenů způsobujících peroperační infekční komplikace. Ampicilin v kombinaci se sulbaktamem je u těchto operací s výhodou používán pro svůj baktericidní účinek, široké antibakteriální spektrum a výhodné farmakokinetické vlastnosti. Cílem práce bylo stanovit koncentraci ampicilinu v plazmě kardiochirurgických pacientů podstupujících revaskularizaci myokardu bez použití extrakorporálníhooběhu a výpočet jeho základních farmakokinetických parametrů. Ke stanovení koncentrace AMP byla využita vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC) s UV VIS detekcí. Naše metoda vychází z již publikované literatury zabývající se stanovením koncentrací ampicilinu (2, 6), avšak byla provedena její optimalizace. K věcnémuověření správnosti naměřených dat byly provedeny výpočty základních individuálních farmakokinetických parametrů. Tatopráce je první částí studie, která má za cíl popsat populační farmakokinetiku ampicilinu jako profylaktického antibiotika u pacientůpodstupujících kardiochirurgický operační výkon s použitímmimotělního oběhu. Materiál a metody Materiál Sodná sůl ampicilinu byla zakoupena od firmy Cayman Chemical Company (Ann Arbor, MI, USA). Jako interní standard byl použit cefalexin monohydrát (CEX) zakoupený od firmy Merck (Darmstadt, Německo). Acetonitril (ACN), methanol (MeOH) a voda (vše pro kapalinovou chromatografii) byly dodány od firmy VWR (Stříbrná Skalice, Česká republika). Dihydrogenfosforečnan draselný a 85% kyselina fosforečná byly zakoupeny od firmy Penta (Praha, Česká republika). Pro extrakci na pevné fázi (SPE) byly využity kolony Discovery DSC-18 od firmy Merck (Darmstadt, Německo). Pro odběr krve byly použity zkumavky VACUETTE 3ml LH (Praha, Česká republika). Pacienti a odběry vzorků Do studie bylo zařazeno 20 pacientů (19 mužů a 1 žena) podstupujících kardiochirurgický operační výkon – revaskularizaci myokardu bez použití mimotělního oběhu na bijícím srdci s použitím speciálního stabilizátoru. Základní charakteristiky souboru jsou uvedeny v tabulce 1. Pacienti zařazení do studie vyjádřili svůj souhlas se zařazením a zpracováním dat v informovaném souhlasu, který byl součástí protokolu studie. Protokol byl schválen Etickou komisí Fakultní nemocnice Olomouc 16. června 2016, č. j. 17-315-40A. Před operačním výkonem byla zjištěna aktuální váha a výška pacientů a základní laboratorní parametry. Pro účely této práce byla použita aktuální hodnota plazmatické koncentrace kreatininu stanovená Oddělením klinické biochemie FN Olomouc a vypočtená hodnota odhadované glomerulární filtrace (eGFR) pomocí vzorce CKD-EPI. Zařazeným pacientům byla 60–30 minut před zahájením operačního výkonu aplikována i.v. bolusová dávka 3g přípravku Unasyn (2g AMP a 1g SUL). V předem stanovených intervalech (15, 30, 45, 60, 120, 180min po podání léčiva a v době ukončení operace) byly pacientovi odebrány 3 ml plné krve do vakuové zkumavky s lithiumheparinem a odstaveny na led. Ihned po skončení operace byly vzorky přeneseny do laboratoře Ústavu farmakologie, kde byla odstředěním plné krve získána plazma. Příprava roztoků Zásobní roztoky AMP a CEX byly připraveny v koncentraci 1000mg/l, ze které byly následně ředěny do finálních koncentrací. Roztok CEX byl zředěn do finální koncentrace 30mg/l a 240mg/l. Přidánímpříslušného objemu zásobního roztoku AMP ke kontrolní plazmě byly získány kalibrační vzorky. Kalibrační křivka pro AMP byla sestavena v rozsahu 2–18mg/l a 10–300mg/l. Příprava vzorků Ke 100 µl vzorku plazmy bylo přidáno 20 µl interního standardu o koncentraci 0,24mg/ml, 50 µl 1M kyseliny fosforečné a 50 µl vody. Po promíchání bylo 100 µl ze vzorku použito pro SPE extrakci. Nejprve byly kolony kondicionovány 1ml 100% acetonitrilu a následně ekvilibrovány 1ml vody. Poté bylo na kolonu naneseno 100 µl vzorku a následně byla kolona promyta 2ml vody. Pro eluci AMP a CEX byl zvolen 1ml 70% acetonitrilu, zahřátého na 37 °C. Výsledný 1ml Tab. 1. Demografické a laboratorní charakteristiky pacientů (n = 20) Parametr Průměrná hodnota Směrodatná odchylka Věk (roky) 65 11 Výška (cm) 174 7 Váha (kg) 84 11 Plazmatická koncentrace kreatininu (µmol/l) 87 36 Odhadovaná glomerulární filtrace (ml/s.1,75m2) 1,19 0,3 Doba trvání operačního výkonu (min) 124 37
RkJQdWJsaXNoZXIy NDA4Mjc=